بررسی متابولومیکس متاسیکلوژنسیس در انگل لیشمانیا ماژور سوش فردلین

مقدمه: لیشمانیا ماژور سوش فردلین( mhom/il/81/friedlin ) یکی از عوامل بیماری لیشمانیازیس پوستی می باشد. سیر زندگی انگل به دو فاز اصلی پروماستیگوت (تاژکدار) و آماستیگوت (بدون تاژک) تقسیم می شود. فاز پروماستیگوت نیز به دو مرحله پروماسیکلیک (غیر بیماری زا) و متاسیکلیک (بیماری زا) تقسیم می گردد. متاسیکلوژنسیس نقطه عطف تغییر شکل از فرم پروسایکلیک به متاسیکلیک است که با تغییرات عمده داخل سلولی همراه است و مسئول بیماری زا شدن انگل می باشد. علم متابولومیکس با استفاده از علوم بیوشیمیایی و بیوانفورماتیک به پروفایل نمودن تمام تغییرات متابولولیکی متاسیکلوژنسیس پرداخته است. این علم واکنش های داخل سلولی, تغییرات متابولیت ها ,پروفایلینگ فرآیندهای شیمیایی, آنالیز میکروبیوملکول هایی که تمام روابط داخل سلولی و خارج سلولی را کنترل می کنند بررسی می کند. مواد و روشها: لیشمانیا ماژور سوش فردلین در محیط آزمایشگاه در هر دو فاز کشت داده شد. نمونه ها در هر فاز شامل 1×109 انگل بودند که با استفاده از روش آگلوتیناسیون پینات از هم جدا شدند. بعد از عصاره گیری, نمونه ها لیوفیلیزه شدند تا برای اسپکتروسکوپی nmr آماده گردند. پودر لیوفیلیزه با 0.1 میلی لیتر از d2o دوباره بصورت محلول در آمده, سپس با دور 45000 g بمدت 20 دقیقه سانتریفیوژ گردید. مقدار 20µl از 4و4- دی متیل-4-سیلاپنتان-1-سولفونیک اسید(dss) با غلظت 1mm بعنوان مرجع به نمونه اضافه گردید. نمونه در دستگاه اسپکترومتر bruker av 400 nmr با گرادیان عملکردی 400.13mhz برای مشاهده پروتون در 298k با پروتکل noesy قرار داده شد. طیف ها برای اصلاح خط پایه, نرمالیزاسیونpareto با فواصل 0.004 پردازش شدند. pca و pls_da برای دسته بندی داده های هر دو فاز استفاده گردید. جابجایی های شیمیایی طیف ها با لودینگ پلات pls_da و دسته بندی نتایج با q2 اشان ارزیابی گردیدند. تغییرات مهم و عمده مشاهده شده در این پردازش های آماری با پایگاه داده ها و مسیرهای متابولیکی مقایسه گردیدند. بحث و نتیجه گیری: نتایج نشان دادند که متابولیسم اسیدهای آمینه, بخصوص شاخه دارها و متابولیسم کربوهیدراتها بخصوص گلوکونئوژنز بیشترین تغییرات را داشتند. گلیکولیز و سنتز پروتئین ها نیز تغییراتی داشتند. این نوع از انگل بسیار هوشمند بوده و بنا به تغییر وضعیت محیط, خود را با شرایط جدید وفق داده و از امکانات در دسترس برای بقا استفاده می کند. از یافته ها, این نتیجه حاصل می شود که در زمان تغییر انگل از فاز لگاریتمی به ایستایی, منبع تامین انرژی انگل از محل کربوهیدراتها به اسیدهای آمینه تغییر می یابد. کلید واژه: لیشمانیا, لیشمانیازیس, متابولومیکس,pca , nmr